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黄曲霉毒素免疫亲合柱反应原理及样品提取说明

发布时间: 2022-01-19  点击次数: 148次
  黄曲霉毒素免疫亲合柱产品概述:
 
  黄曲霉毒素是一类真菌(如黄曲霉和寄生曲霉)的有毒性的代谢产物,是一种毒性*的物质,具有很强的致癌性。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织的破坏作用,严重时可导致肝癌甚至死亡。在天然污染的食品中以黄曲霉毒素B1为多见,其毒性和致癌性也是*的。在玉米、花生、小麦、棉花种子和一些干果中常能检测到黄曲霉毒素B1。
 
  反应原理:
 
  黄曲霉毒素免疫亲合柱测定的原理是抗原抗体反应。黄曲霉毒素B1单克隆抗体固定于柱内凝胶上,样品中的黄曲霉毒素B1经过提取、过滤、稀释,然后缓慢通过黄曲霉毒素B1免疫亲和柱,在柱内黄曲霉毒素B1与抗体特异性结合,之后洗涤免疫亲和柱,除去未结合的其他物质。用甲醇洗脱黄曲霉毒素B1,注入到分析仪器中进行检测。
 
  黄曲霉毒素免疫亲合柱检测样品提取及稀释:
 
  大米、玉米、小麦、坚果、调料、花生及其制品:准确称取试样25.0g于250mL具塞锥形瓶中,加入5.0g氯化钠及准确加入125.0mL甲醇-水(7+3),以均质器高速搅拌提取2min。槽纹滤纸过滤,准确移取15.0mL滤液并加入30.0mL水稀释,用玻璃纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用。
 
  植物油脂:准确称取试样25.0g于250mL具塞锥形瓶中,加入5.0g氯化钠及入125.0mL甲醇-水(7+3),以均质器高速搅拌提取2min。槽纹滤纸过滤,准确移取15.0mL滤液并加入30.0mL水稀释,用玻璃纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用。
 
  酱油:称取试样50.0g于250.0mL具塞锥形瓶中,加入2.5g氯化钠及加入甲醇-水(8+2)至100.0mL,以均质器高速搅拌提取1min。槽纹滤纸过滤,准确移取10.0mL滤液并加入40.0mL水稀释,用玻璃纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用。
 
  食醋:准确称取5.0g样品,加入1.0g氯化钠,以pH7.0磷酸盐缓冲溶液稀释至25.0mL,混匀,定量滤纸过滤。取10.0mL滤液加入10.0mL pH7.0磷酸盐缓冲溶液,混匀。以玻璃纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用。
 
  饲料:准确称取试样50.0g于250mL具塞锥形瓶中,加入5.0g氯化钠及入100.0mL甲醇-水(8+2),以均质器高速搅拌提取2min。槽纹滤纸过滤,准确移取10.0mL滤液并加入40.0mL pH7.0 PBS稀释,用玻璃纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用。
 
  样品的净化
 
  黄曲霉毒素免疫亲合柱的柱容量(最大吸附黄曲霉毒素量)为300ng,当样品中黄曲霉毒素超过测定范围时,请适当减小上柱体积,使其在检测范围内,计算出准确含量。
 
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