黄曲霉毒素是一种霉菌毒素,主要由寄生曲霉和黄曲霉在多种环境条件下在谷物成熟、收获和贮藏过程中产生。AFB1污染食物链和环境会对人类、家禽和家畜产生各种潜在的有害后果。如致癌、胚胎毒性、免疫抑制和致畸作用。在众多AFB1测定方法中,免疫测定由于其在短时间内分析大量样品的适用性、敏感性和快速反应性而成为常用的方法,然而荧光免疫测定法(FLISA)比传统的免疫测定法灵敏度更高,因此使用率不断提高。与此同时,镉量子点(QD)由于其*的光谱特性,作为荧光信号探针的使用也有所增加。如CdTe/CdS/ZnS量子点包含CdS和ZnS的壳,不仅可以使荧光强度急剧增加,而且ZnS壳可以阻止了有毒Cd2+的释放,可作为荧光探针,在细胞标记和靶标分析方面具有广泛的前景。
黄曲霉毒素的检测方法:
1、生物鉴定法其特点是待检样品不需很纯,主要用于定性,共有10种:①抑菌试验;②对微生物遗传因子影响试验;③细菌发光试验;④荧光反应;⑤组织培养检测法;⑥鸡胚试验;⑦鸭胚试验;⑧鳟鱼试验;⑨植物试验;⑩饲喂实验动物试验。生物鉴定法是利用AFT能影响微生物、水生动物、家禽等生物体的细胞代谢,来鉴定AFT的存在。其方法专一性差,灵敏度低,一般只作为化学分析法的佐证。
2、化学分析法常用的为薄层层析法(TLC),适用于粮食及其制品、调味品等AFB1的检测,主要是半定量。利用AFB1具有荧光性的特点,提取和浓缩样品中的AFB1,用单向或双向展开法在薄层上分离后,在365nm紫外光照射下产生蓝紫色荧光,根据在薄层上显示荧光的最小检出量定量,其灵敏度为5μg/kg。由于薄层层析法测定AFB1不是很专一,因此样品中其他荧光物质的干扰造成测定误差。可以用以下方法进行确定:一是用多种溶剂系统展开,可将AFB1、G1及各种AFT类似物分开;二是采用层析斑点的化学试验,将样品提取物用甲酸亚硫酰氨或三氟醋酸处理,用衍生化的方法将AFB1与其类似物分开;三是层析斑点的物理试验,可根据紫外吸收光谱,红外吸收光谱和荧光屏光谱的差别,将非黄曲霉毒素和AFT分开。
3、仪器分析法高效液相色谱法(HPLC)是20世纪70年代初发展起来的一种以液体为流行相的新型色谱技术。是分离分析各种AFT的好方法,如配以荧光检测器,则该法具有灵敏度高、分离能力强、特异性好、测定结果准确可靠等优点。在国外己广泛地用于食品中AFT的测定。但由于食物样品成分复杂,在进行液相色谱分离分析前,需对样品作有效的净化处理。常用的净化方法是柱色谱法,该法操作繁琐,且需使用大量有机溶剂。免疫亲和柱作为AFT特异有效的分离净化和浓缩手段,一出现就和高效液相色谱法结合用来测定粮食、饮料、尿、血及奶中的AFT。将免疫亲和柱的高度特异性和高效液相色谱法的高分离能力相结合,所建立的花生和玉米中AFBl、B2、G1、G2的测定方法,具有杂质干扰少、操作简便、使用有机溶剂少、灵敏准确等优点,整个分析操作可在15min内完成。