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分享三种关于呕吐毒素免疫亲和柱对样品处理的方法

发布时间: 2021-06-17  点击次数: 18次
  呕吐毒素免疫亲和柱主要是由镰刀菌的某些种产生的化学结构和生物活性相似的有毒代谢产物——单端孢霉烯族化合物中的一种。广泛存在于全球,主要污染小麦、大麦、玉米等谷类作物,也污染粮食制品,人和动物在误食被该毒素污染的粮谷类后可以产生广泛的毒性效应。DON明显的毒性作用是引起呕吐、腹泻、腹痛等症状,并延缓生长、降低免疫机能,与贫血、免疫抑制、食管癌、克山病也具有密切联系。给人、家畜的健康造成巨大威胁。
 
  试验原理:
  本产品的测定的基础是抗原抗体反应,脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体连接在柱内凝胶上,样品中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢的通过脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫亲和层析柱,在免疫亲和柱内,脱氧雪腐镰刀菌烯醇与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他物质。用甲醇洗脱脱氧雪腐镰刀菌烯醇,然后注入到分析仪器中用于检测。

  呕吐毒素免疫亲和柱的样品处理:
  方法一:酒类
  取脱气的酒类样品加入聚乙二醇8000,用PBS缓冲液定容;高速均质;用快速定性滤纸过滤,收集滤液;再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;取上样液过免疫亲和柱净化。
  稀释倍数:2
 
  方法二:酱油、醋、酱及酱制品;
  取样品,加入聚乙二醇8000,用PBS缓冲液定容;高速均质;用快速定性滤纸过滤,收集滤液;再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;取上样液过免疫亲和柱净化。
  稀释倍数:2
 
  方法三:粮食及饲料
  1、玉米、小麦、面粉、配合饲料、浓缩料、精补料等吸水性较小的样本;
  称取粉碎样品,聚乙二醇8000,加入蒸馏水;高速均质;用快速定性滤纸过滤,收集滤液;再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;取上样液过免疫亲和柱净化。
  稀释倍数:2
  2、麸皮、豆皮、玉米胚芽粕、米糠等吸水性较强的样本;
  称取样品,聚乙二醇8000,加入蒸馏水;高速均质;用快速定性滤纸过滤,收集滤液;再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;取上样液过免疫亲和柱净化。
  稀释倍数:2
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